胶原原代细胞培养试剂盒

产品详情:

胶原原液
来源 牛跟腱
形态 透明至乳白色液体
胶原浓度 1 mg/mL
纯度 ≥99%,通过SDS-PAGE检测
pH 2-4
内毒素 < 0.5 EU/mL

 

产品说明:

细胞外基质对细胞的发育和行为有极大的影响。Ⅰ型胶原作为细胞外基质的主要组成成分,常用于原代细胞培养。Ⅰ型胶原存在于大多数组织和器官中,尤其是跟腱,骨和真皮。Ⅰ型胶原是由2条α1链和1条α2链组成的长约300 nm的异源三聚体[α1( I )α2( I )]。

Ⅰ型胶原蛋白可用于原代肝脏细胞培养,作为培养基底可维持肝细胞功能,维持分化状态,增强肝细胞基因转录水平。其也可用于间充质干细胞的扩增,维持禽类骨骼肌管状细胞的分化,也可用于研究原代成纤维细胞对外界环境的响应。赤萌胶原蛋白来源于国内顶级技术提取的活性牛Ⅰ型胶原,可用于多种培养表面的包被,促进细胞的粘附、生长、增殖或分化。

 

使用说明:

1.  根据表1计算包被细胞培养盘/瓶/板需要的胶原稀释液总体积及试剂盒中各成分添加的量。

2.  取无菌管,加入适量体积的细胞培养用水。

3.  接下来,加入对应体积的胶原溶液,颠倒混匀。

4.  将稀释液按照表1,加入需包被的细胞培养器皿。

5.  37℃孵育30 min(或室温1 h,或2-8℃过夜)。

6.  小心的吸弃稀释液。

7.  加入1X PBS清洗一遍,即可使用。

 

表1推荐胶原稀释液用量及试剂盒各成分添加量(以10 μg/mL终浓度计算)

  细胞培养器皿 稀释液总体积(mL) 细胞培养用水(mL) 胶原原液
(mL)
细胞培养盘 35 mm 1 1 0.01
60 mm 3 3 0.03
100 mm 5 5 0.05
150 mm 10 10 0.1
细胞培养瓶 T-25 3 3 0.03
T-75 5 5 0.05
T-175 17 17 0.17
细胞培养板 6~96孔板* 6 6 0.06
各种规格细胞培养板每孔建议的稀释液添加量 96孔板 0.05 mL/孔 - -
48孔板 0.1 mL/孔 - -
24孔板 0.2 mL/孔 - -
12孔板 0.5 mL/孔 - -
6孔板 1 mL/孔 - -

注:*由于细胞培养板每孔所需胶原稀释液体积过小,因此不计算每孔所需细胞培养用水和胶原原液的体积,仅提供整个细胞培养板包被需要胶原稀释液总体积。

 

注意事项:

1.  稀释液应现用现配。配置后由于蛋白浓度低,胶原蛋白会吸附到稀释用或储存用的容器上。

2.  包被好的细胞培养盘/瓶/板可储存于2-8℃,一周内可用。

3.  胶原原液不能冷冻,冷冻后再解冻会产生蛋白变性及蛋白沉淀。

4.  当胶原原液出现浑浊不透明时,可能存在污染。

 

 

胶原原代细胞培养试剂盒说明书

 

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