胶原原代细胞培养试剂盒
产品详情:
| 胶原原液 | |
| 来源 | 牛跟腱 |
| 形态 | 透明至乳白色液体 |
| 胶原浓度 | 1 mg/mL |
| 纯度 | ≥99%，通过SDS-PAGE检测 |
| pH | 2-4 |
| 内毒素 | < 0.5 EU/mL |
产品说明：
细胞外基质对细胞的发育和行为有极大的影响。Ⅰ型胶原作为细胞外基质的主要组成成分，常用于原代细胞培养。Ⅰ型胶原存在于大多数组织和器官中，尤其是跟腱，骨和真皮。Ⅰ型胶原是由2条α1链和1条α2链组成的长约300 nm的异源三聚体[α1( I )2 α2( I )]。
Ⅰ型胶原蛋白可用于原代肝脏细胞培养，作为培养基底可维持肝细胞功能，维持分化状态，增强肝细胞基因转录水平。其也可用于间充质干细胞的扩增，维持禽类骨骼肌管状细胞的分化，也可用于研究原代成纤维细胞对外界环境的响应。赤萌胶原蛋白来源于国内顶级技术提取的活性牛Ⅰ型胶原，可用于多种培养表面的包被，促进细胞的粘附、生长、增殖或分化。
使用说明：
1. 根据表1计算包被细胞培养盘/瓶/板需要的胶原稀释液总体积及试剂盒中各成分添加的量。
2. 取无菌管，加入适量体积的细胞培养用水。
3. 接下来，加入对应体积的胶原溶液，颠倒混匀。
4. 将稀释液按照表1，加入需包被的细胞培养器皿。
5. 37℃孵育30 min（或室温1 h，或2-8℃过夜）。
6. 小心的吸弃稀释液。
7. 加入1X PBS清洗一遍，即可使用。
表1推荐胶原稀释液用量及试剂盒各成分添加量（以10 μg/mL终浓度计算）
| 细胞培养器皿 | 稀释液总体积（mL） | 细胞培养用水（mL） | 胶原原液 | |
| （mL） | ||||
| 细胞培养盘 | 35 mm | 1 | 1 | 0.01 |
| 60 mm | 3 | 3 | 0.03 | |
| 100 mm | 5 | 5 | 0.05 | |
| 150 mm | 10 | 10 | 0.1 | |
| 细胞培养瓶 | T-25 | 3 | 3 | 0.03 |
| T-75 | 5 | 5 | 0.05 | |
| T-175 | 17 | 17 | 0.17 | |
| 细胞培养板 | 6~96孔板* | 6 | 6 | 0.06 |
| 各种规格细胞培养板每孔建议的稀释液添加量 | 96孔板 | 0.05 mL/孔 | - | - |
| 48孔板 | 0.1 mL/孔 | - | - | |
| 24孔板 | 0.2 mL/孔 | - | - | |
| 12孔板 | 0.5 mL/孔 | - | - | |
| 6孔板 | 1 mL/孔 | - | - |
注：*由于细胞培养板每孔所需胶原稀释液体积过小，因此不计算每孔所需细胞培养用水和胶原原液的体积，仅提供整个细胞培养板包被需要胶原稀释液总体积。
注意事项：
1. 稀释液应现用现配。配置后由于蛋白浓度低，胶原蛋白会吸附到稀释用或储存用的容器上。
2. 包被好的细胞培养盘/瓶/板可储存于2-8℃，一周内可用。
3. 胶原原液不能冷冻，冷冻后再解冻会产生蛋白变性及蛋白沉淀。
4. 当胶原原液出现浑浊不透明时，可能存在污染。
